游戏《暗黑破坏神3》中，暗黑破坏神蛛后的具体位置在冒险模式第一幕第八节蜘蛛洞的最深处。玩家需要一直深入蜘蛛洞穴，直到进入蛛后洞窟腔室后，就可以找到阿拉尼娅蛛后。玩家可以利用擅长使用吐丝和缓速的特点，在远程被缠上时很容易被蛛后近身，还会以自身为中心施展瘟疫。完成任务后，玩家可以继续游戏。