1.处理材料
a.如提取材料为血液，可直接使用200μl新鲜、冷冻或加入各种抗凝剂的血液，不足200μl可加缓冲液GA补足；
注意：
如需处理更大体积血液，如300μl-1ml，应按以下步骤操作：在样品中加入3倍体积红细胞裂解液（例如，300μl血液加入900μl红细胞裂解液），颠倒混匀，室温放置5min，期间再颠倒混匀几次。10000rpm(~11,500×g)离心1min（若离心机最高转速不允许，可3000rpm(~3,400×g)离心5min），吸去上清，留下白细胞沉淀，加200μl缓冲液GA，振荡至彻底混匀。
b.如果处理血样为禽类、鸟类、两栖类或更低级生物的抗凝血液，其红细胞为有核细胞，因此处理量5-20μl，可加缓冲液GA补足200μl后进行下面的裂解步骤。
c.贴壁培养的细胞应先处理为细胞悬液，然后10,000rpm(~11,200×g)离心1min，倒尽上清，加200μl缓冲液GA，振荡至彻底悬浮；
d.动物组织（脾组织用量应少10mg）应先打碎处理为细胞悬液，然后10,000rpm(~11,200×g)离心1min，倒尽上清，加200μl缓冲液GA，振荡至彻底悬浮。
注意：
如果需要去除RNA，可加入4μlRNaseA（100mg/ml）溶液（客户自备，目录号：RT405-12），振荡15sec，室温放置5min。
2.加入20μlProteinaseK溶液，混匀。
a.提取血液基因组时，只需加入ProteinaseK混匀，即可继续进行下一步。
b.提取细胞基因组时，只需加入ProteinaseK混匀，即可继续进行下一步。
c.提取组织基因组时，加入ProteinaseK混匀后，在56℃放置，直至组织溶解，
简短离心以去除管盖内壁的水珠，再进行下一步骤。
注意：
不同组织裂解时间不同，通常需1-3h即可完成（鼠尾需要消化过夜）。不会影响后续操作。每小时颠倒混合样品2-3次，用水浴振荡器也可。
3.加入200μl缓冲液GB，充分颠倒混匀，70℃放置10min，溶液应变清亮，简短离心以去除管盖内壁的水珠。
注意：
加入缓冲液GB时可能会产生白色沉淀，一般70℃放置时会消失，不会影响后续实验。如溶液未变清亮，说明细胞裂解不彻底，可能导致提取DNA量少和提取出的DNA不纯。当血液体积≤200μl且没有采用红细胞裂解处理，或是样本储存条件不佳，水浴后颜色可能为深褐色，注意溶液中没有团块等沉淀。
4.加人200μl无水乙醇，充分振荡混匀15sec，此时可能会出现絮状沉淀，简短离心以去除管盖内壁的水珠。
5.将上一步所得溶液和絮状沉淀都加入一个吸附柱CB3中（吸附柱放入收集管中），12,000rpm(~13,400×g)离心30sec，倒掉废液，将吸附柱CB3放回收集管中。
6.向吸附柱CB3中加入500μl缓冲液GD（使用前请先检查是否已加入无水乙醇），12,000rpm(~13,400×g)离心30sec，倒掉废液，将吸附柱CB3放入收集管中。
7.向吸附柱CB3中加入600μl漂洗液PW（使用前请先检查是否已加入无水乙醇），12,000rpm(~13,400×g)离心30sec，倒掉废液，将吸附柱CB3放入收集管中。
8.重复操作步骤7。
9.将吸附柱CB3放回收集管中，12,000rpm(~13,400×g)离心2min，倒掉废液，将吸附柱CB3置于室温放置数分钟，以彻底晾干吸附材料中残余的漂洗液。
注意：
这一步的目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除，漂洗液中乙醇的残留会影响后续的酶反应（酶切、PCR等）实验。
10.将吸附柱CB3转入一个干净的离心管中，向吸附膜的中间部位悬空滴加50-200μl洗脱缓冲液TE，室温放置2-5min，12,000rpm(~13,400×g)离心2min，将溶液收集到离心管中。
注意：
洗脱缓冲液体积不应少于50μl，体积过小影响回收效率。洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响。若用ddH2O做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5范围内，pH值低于7.0会降低洗脱效率；且DNA产物应保存在-20℃，以防DNA降解。为增加基因组DNA的得率，可将离心得到的溶液再加入吸附柱CB3中，室温放置2min，12,000rpm(~13,400×g)离心2min。
a.如提取材料为血液，可直接使用200μl新鲜、冷冻或加入各种抗凝剂的血液，不足200μl可加缓冲液GA补足；
注意：
如需处理更大体积血液，如300μl-1ml，应按以下步骤操作：在样品中加入3倍体积红细胞裂解液（例如，300μl血液加入900μl红细胞裂解液），颠倒混匀，室温放置5min，期间再颠倒混匀几次。10000rpm(~11,500×g)离心1min（若离心机最高转速不允许，可3000rpm(~3,400×g)离心5min），吸去上清，留下白细胞沉淀，加200μl缓冲液GA，振荡至彻底混匀。
b.如果处理血样为禽类、鸟类、两栖类或更低级生物的抗凝血液，其红细胞为有核细胞，因此处理量5-20μl，可加缓冲液GA补足200μl后进行下面的裂解步骤。
c.贴壁培养的细胞应先处理为细胞悬液，然后10,000rpm(~11,200×g)离心1min，倒尽上清，加200μl缓冲液GA，振荡至彻底悬浮；
d.动物组织（脾组织用量应少10mg）应先打碎处理为细胞悬液，然后10,000rpm(~11,200×g)离心1min，倒尽上清，加200μl缓冲液GA，振荡至彻底悬浮。
注意：
如果需要去除RNA，可加入4μlRNaseA（100mg/ml）溶液（客户自备，目录号：RT405-12），振荡15sec，室温放置5min。
2.加入20μlProteinaseK溶液，混匀。
a.提取血液基因组时，只需加入ProteinaseK混匀，即可继续进行下一步。
b.提取细胞基因组时，只需加入ProteinaseK混匀，即可继续进行下一步。
c.提取组织基因组时，加入ProteinaseK混匀后，在56℃放置，直至组织溶解，
简短离心以去除管盖内壁的水珠，再进行下一步骤。
注意：
不同组织裂解时间不同，通常需1-3h即可完成（鼠尾需要消化过夜）。不会影响后续操作。每小时颠倒混合样品2-3次，用水浴振荡器也可。
3.加入200μl缓冲液GB，充分颠倒混匀，70℃放置10min，溶液应变清亮，简短离心以去除管盖内壁的水珠。
注意：
加入缓冲液GB时可能会产生白色沉淀，一般70℃放置时会消失，不会影响后续实验。如溶液未变清亮，说明细胞裂解不彻底，可能导致提取DNA量少和提取出的DNA不纯。当血液体积≤200μl且没有采用红细胞裂解处理，或是样本储存条件不佳，水浴后颜色可能为深褐色，注意溶液中没有团块等沉淀。
4.加人200μl无水乙醇，充分振荡混匀15sec，此时可能会出现絮状沉淀，简短离心以去除管盖内壁的水珠。
5.将上一步所得溶液和絮状沉淀都加入一个吸附柱CB3中（吸附柱放入收集管中），12,000rpm(~13,400×g)离心30sec，倒掉废液，将吸附柱CB3放回收集管中。
6.向吸附柱CB3中加入500μl缓冲液GD（使用前请先检查是否已加入无水乙醇），12,000rpm(~13,400×g)离心30sec，倒掉废液，将吸附柱CB3放入收集管中。
7.向吸附柱CB3中加入600μl漂洗液PW（使用前请先检查是否已加入无水乙醇），12,000rpm(~13,400×g)离心30sec，倒掉废液，将吸附柱CB3放入收集管中。
8.重复操作步骤7。
9.将吸附柱CB3放回收集管中，12,000rpm(~13,400×g)离心2min，倒掉废液，将吸附柱CB3置于室温放置数分钟，以彻底晾干吸附材料中残余的漂洗液。
注意：
这一步的目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除，漂洗液中乙醇的残留会影响后续的酶反应（酶切、PCR等）实验。
10.将吸附柱CB3转入一个干净的离心管中，向吸附膜的中间部位悬空滴加50-200μl洗脱缓冲液TE，室温放置2-5min，12,000rpm(~13,400×g)离心2min，将溶液收集到离心管中。
注意：
洗脱缓冲液体积不应少于50μl，体积过小影响回收效率。洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响。若用ddH2O做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5范围内，pH值低于7.0会降低洗脱效率；且DNA产物应保存在-20℃，以防DNA降解。为增加基因组DNA的得率，可将离心得到的溶液再加入吸附柱CB3中，室温放置2min，12,000rpm(~13,400×g)离心2min。
